酶標(biāo)儀可以檢測(cè)一些實(shí)質(zhì)性的感染和病變,避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段,光電檢測(cè)器將這一待測(cè)標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào)。
酶標(biāo)儀單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分標(biāo)本照射到光電檢測(cè)器上,電信號(hào)經(jīng)前置放大,對(duì)數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,*后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。微處理機(jī)還通過(guò)控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動(dòng)來(lái)移動(dòng)微孔板,實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)過(guò)程,另一些酶標(biāo)儀是采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測(cè),使酶標(biāo)儀更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡(jiǎn)單。
酶標(biāo)儀光是電磁波,波長(zhǎng)100nm——400nm稱為紫外光,400nm——780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。綠色植物之所以是綠色,是因?yàn)橹参镂盏拇蟛糠譃榧t橙光和藍(lán)紫光,但對(duì)綠色不吸收,反射出來(lái),呈現(xiàn)為綠色。酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下,檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測(cè)樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液。在使用酶標(biāo)儀的時(shí)候,我們應(yīng)該注意這些方面:
(一)外觀
酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱,型號(hào),編號(hào),生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開(kāi)關(guān)均能正常工作,外表面無(wú)明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
(二)酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)
選用492nm波長(zhǎng),在吸光度o.0A處,測(cè)量標(biāo)稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測(cè)量操作按儀器說(shuō)明進(jìn)行),記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測(cè)量值之差不應(yīng)超過(guò)±0.00。
(三)吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度
選用405,492和620nm波長(zhǎng),以空氣為參比,分別測(cè)量標(biāo)稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測(cè)試板代替酶標(biāo)板,按儀器說(shuō)明連續(xù)測(cè)量3次,按下式計(jì)算準(zhǔn)確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為標(biāo)準(zhǔn)值)。
(四)吸光度測(cè)量的重復(fù)性
波長(zhǎng)選用同(3),在酶標(biāo)板排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重復(fù)測(cè)量5次。記錄每次測(cè)量的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值。
(五)酶標(biāo)儀的線性
選用540nm波長(zhǎng),將標(biāo)稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入測(cè)試板樣本位置中,以空氣為參比,各重復(fù)測(cè)量3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測(cè)試板的同一孔位中,重復(fù)測(cè)量3次。
(六)測(cè)量速度的檢定
選用492nm波長(zhǎng),放人96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)量,用秒表計(jì)測(cè)儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。
酶標(biāo)儀除了在選購(gòu)時(shí),應(yīng)盡可能自檢外,在用于中也應(yīng)定期檢定,以保證酶標(biāo)儀測(cè)量的有效性。